中譜科技（福州）有限公司
支持與應用
支持與應用
肉制品中苯甲酸與山梨酸的測定
發(fā)布時間：
2019-02-14
1、適用范圍
適用于肉制品、紅酒中苯甲酸與山梨酸含量的檢測。
2、溶液的配置
苯甲酸標準儲備液（1mg/mL）：稱取苯甲酸標準品50mg，置于50ml容量瓶中，加入2.5ml乙醇溶解，用水定容至刻度。
山梨酸標準儲備液（1mg/mL）：稱取山梨酸標準品50mg，置于50ml容量瓶中，加入2.5ml乙醇溶解，用水定容至刻度。
苯甲酸、山梨酸混合標準工作液（10μg/mL）：分別量取1mg/mL苯甲酸標準儲備液1.0mL、1mg/mL山梨酸標準儲備液1.0mL至100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度。
洗脫液：甲酸/甲醇水=2/98（8：2）：量取甲醇400mL、水100mL混勻，該溶液即為80%甲醇水；取490mL 80%甲醇水，加入10mL 甲酸，混勻，該溶液即為洗脫液。
磷酸鹽緩沖溶液（流動相）：分別稱取2.5g KH2PO4、2.5g K2HPO4于1L容量瓶中，加水定容至刻度。
3、提取步驟
一、熟牛肉：
稱取1g樣品，于50ml離心管中，加入2ml三氯甲烷，10ml水，充分勻漿后8000rpm/min 離心5min。取上清液待凈化。另使用15ml水清洗勻漿機刀頭，清洗液倒入樣品殘渣中再提取一次，8000rpm/min 離心5min，合并兩次上清液待凈化。
二、紅酒
量取1ml樣品，加入0.5mL 1mol/L氫氧化鈉溶液，待凈化。
4、SPE凈化步驟
SPE柱：月旭Welchrom? P-SAX，規(guī)格：200 mg/6mL。
活化：5mL甲醇，5mL水，棄去
上樣：待凈化液全部上樣，棄去
淋洗：5mL水（潤洗離心管），棄去，抽干
洗脫：5mL洗脫液，收集于15ml離心管中，抽干
50℃氮吹至約500μL，用流動相定容至5ml，上HPLC檢測。
5、注意事項
1） 上樣速度不能過快，保持在1ml/min；
2） 紅酒加標過程：1ml樣品中，分別加入10μg/mL標準使用液25μL、100μL、1mL，其加標水平即為0.25mg/L、1mg/L、10mg/L。
3） 熟牛肉加標過程：1g樣品中，分別加入10μg/mL標準使用液25μL、100μL、1mL，其加標水平即為0.25mg/kg、1mg/kg、10mg/kg。
6、色譜條件
色譜柱：月旭Ultimate?XB-C18（4.6 x 250 mm, 5 μm）
流動相：磷酸鹽緩沖溶液/乙腈=(9/1)
流速：1.2mL/min
柱溫：30℃
進樣量：20μL
檢測波長：227nm；
7、色譜圖及加標回收率結(jié)果
表1：相關(guān)峰信息
表2：熟牛肉樣品加標回收率
表3：紅酒樣品加標回收率
8、相關(guān)產(chǎn)品信息
